El ADP intravascular y las nucleotidasas solubles contribuyen al estado protrombótico agudo durante el ejercicio vigoroso en humanos

RESUMEN

El ATP y ADP extracelular desencadenan eventos de señalización vasolidatadora y protrombótica en las vasculatura. Aquí, evaluamos la hipótesis de que el cambio en el nucleótido es activado en el torrente sanguíneo de los humanos que se ejercitan, contribuyendo así a una reactividad aumentada de las plaquetas y hemostasia. Se tomaron muestras de sangre de aurícula derecha, sangre arterial y venosa de atletas de resistencia entrenados  en descanso, durante ejercicio submaximal y maximal en el cicloergómetro, y después en la recuperación temprana. Los análisis de ensayo por bioluminiscencia específica para ATP, junto con el análisis cromatográfico de líquidos de alto espectro revelaron que las concentraciones plasmáticas de ATP y ADP incrementaron más de 2.5 veces durante el ejercicio maximal. Subsecuentemente el análisis citométrico de flujo mostró que el plasma de los sujetos que se ejercitan significativamente tiene una regulación a la alta de la superficie de expresión de las P-selectinas de las plaquetas humanas y estos efectos protrombóticos fueron disminuyendo después de buscar nucleótidos del plasma con apirasa exógena. Después, utilizando ensayos cromatográficos de capa delgada con nucleótidos marcados con [gamma-(32)P]ATP y (3)H/(14)C, demostramos que dos enzimas solubles inactivadoras de nucleótidos, la nucleótido pirofosfatasa/fosfodiesterasa y la nucleósido trisfosfato difosfohidrolasa, circulan constituyentemente en el torrente sanguíneo humano. Impresionantemente, las actividades de la nucleótido pirofosfatasa y de la hidrolasa séricas aumentaron durante el ejercicio máximo en 20-25 y 80-100%, respectivamente, y posteriormente disminuyeron después de 30 min de recuperación. Así mismo, las nucleotidasas solubles fueron reguladas a la alta transitoriamente en la sangre venosa de los sujetos sedentarios durante el ejercicio extenuante. El suero humano también contiene 5'-nucleotidasa, adenilato cinasa y nucleósido difosfato cinasa (NDP); sin embargo, la actividad de estas se mantuvieron sin cambios durante el ejercicio. En conclusión, el ADP intravascular aumenta significativamente la actividad de las plaquetas durante el ejercicio extenuante y estas respuestas protrombóticas son contrarrestadas por la liberación concurrente de enzimas nucleótido-inactivantes solubles. Estos hallazgos aportan un nuevo punto de vista en los mecanismos subyacentes que aumentan el riesgo de la formación de trombos oclusivos en condiciones de ejercicio.